活细胞扫描分析仪是一种集成多种先进技术的设备,用于实时监测和分析活细胞的状态与行为。以下是其组成和工作原理的具体介绍:
一、设备组成
1. 光学成像系统:采用倒置显微镜结构,集成相衬聚光镜、高数值孔径物镜及高灵敏度相机(如CMOS/sCMOS传感器),支持明场、相差、荧光等多种成像模式。部分型号配备超分辨技术(如SIM/STED)或全息成像模块,可实现亚微米级分辨率与无标记3D重构。
2. 自动化控制模块:包含电动物镜切换、电动载物台(行程可达115×75mm)、自动对焦系统(远红外激光识别焦平面)及程序化操作界面,支持自定义扫描区域、时间间隔及多孔板连续成像。
3. 环境维持单元:内置恒温恒湿控制系统(温度±0.5℃,湿度±5%RH),适配CO₂培养箱环境;采用低光毒性设计(如GR荧光光源+智能视场光阑),减少长时间观测对细胞活性的影响。
4. 智能分析软件:集成AI算法实现细胞计数、融合度分析、划痕愈合率计算等功能,并可生成生长曲线、动态视频及统计学图表。深度学习模型还能辅助识别细胞周期阶段或凋亡特征。
二、工作原理
1. 光学成像与信号采集:通过多通道LED光源激发特定波长荧光(如DAPI/GFP/Texas Red),结合滤光片分离发射光谱,捕获细胞形态及分子标记信息。高速相机以最高40帧/秒速率记录动态过程,配合Z轴分层扫描实现三维重建。
2. 非侵入式传感技术:部分设备采用微电极阵列检测细胞贴附引起的阻抗变化,将生理活动转化为电信号,量化增殖速率与存活状态。此类技术无需染色即可连续监测,适用于干细胞扩增质控等场景。
3. 自动化流程管理:预设实验模板可一键启动多孔板全景扫描或延时摄影任务,系统自动校准曝光参数并追踪选定区域。远程控制功能允许通过网络实时查看数据,降低人为干预导致的污染风险。
4. 数据处理与可视化:原始图像经去噪、分割后提取单细胞轮廓,计算面积、迁移轨迹等参数。时间序列数据则生成剂量效应曲线或分化趋势图,支持药物筛选结果的直观对比。